關(guān)于微囊藻毒素的測(cè)定

2022-08-12 11:59:58 0 雙良環(huán)境

　　近年來(lái)，淡水水體富營(yíng)養(yǎng)化引起的藻類(lèi)大量繁殖及相關(guān)藻毒素污染已在世界范圍內(nèi)被廣泛報(bào)道。微囊藻毒素(microcystins，MCs)是由微囊藻屬、魚(yú)腥藻屬等藻類(lèi)產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物，其分布廣、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、毒性強(qiáng)，可通過(guò)飲用水、水產(chǎn)品和農(nóng)作物等途徑進(jìn)入人體，對(duì)肝臟、腎臟、生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等具有毒性效應(yīng)，對(duì)人體健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。

　　MCs具有親水性，在水中溶解度最高可達(dá)1 g/L。同時(shí)，MCs具有很強(qiáng)的耐熱性，在300 ℃條件下仍能保持較長(zhǎng)時(shí)間不分解，加之耐酸堿，一旦自來(lái)水和食品發(fā)生MCs污染，高溫烹調(diào)和煮沸等加工過(guò)程均不易將其破壞和去除，食品安全即無(wú)法保障。大量研究表明，MCs能夠在螺類(lèi)、貝類(lèi)、魚(yú)、蝦等多種水產(chǎn)品中積累并沿食物鏈轉(zhuǎn)移。

　　因此，急需開(kāi)發(fā)用于檢測(cè)食品中MCs的快速監(jiān)測(cè)工具和改善食品中降解MCs的技術(shù)，以保護(hù)公眾健康和確保食品安全與質(zhì)量。

　　檢測(cè)微囊藻毒素有哪些方法呢

　　目前對(duì)MCs的檢測(cè)有很多方法,如高效液相色譜(HPLC)、薄層層析法(TLC)、質(zhì)譜(MS)、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法 ,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)( ELISA)以及蛋白磷酸酶抑制試驗(yàn) (protein phosphatase inhibition assay , PPIA)等。其中高效液相色譜 - 紫外檢測(cè)(HPLC-UVD) 和質(zhì)譜法(LC-MS)設(shè)備昂貴 ,大量的同源物卻只有很小范圍可選擇作為標(biāo)準(zhǔn)。且這些方法還需要高素質(zhì)的工作人員 ,微囊藻毒素含量 ≤1mg/L 的檢測(cè)極限則需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)濃縮。而酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)是利用抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)標(biāo)本中微量物質(zhì)的方法 ,由于具有簡(jiǎn)單、快速、靈敏、低成本等優(yōu)勢(shì) ,越來(lái)越受到廣泛的關(guān)注。

　　關(guān)于酶標(biāo)抗體法

　　國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《水中微囊藻毒素的測(cè)定 GB/T 20466—2006》規(guī)定了高效液相色譜法和間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定水中微囊藻毒素(環(huán)狀七肽)的條件和詳細(xì)分析步驟?！妒称钒踩珖?guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水產(chǎn)品中微囊藻毒素的測(cè)定 GB 5009.273—2016》中規(guī)定了，水產(chǎn)品微囊藻毒素(環(huán)狀七肽)的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜和間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附的測(cè)定方法。下面我們介紹一下酶聯(lián)免疫吸附法在檢測(cè)微囊藻毒素中的運(yùn)用。

　　酶標(biāo)抗體法，又名酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay，簡(jiǎn)稱(chēng)ELISA)，酶聯(lián)免疫吸附法是一項(xiàng)把抗原抗體的免疫反應(yīng)和酶的高效催化作用原理有機(jī)結(jié)合起來(lái)的一種檢測(cè)技術(shù)。該技術(shù)的主要依據(jù)有三點(diǎn) : (1) 抗體吸附在固相載體表面后 ,仍具有和抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)的特性;(2)抗原和酶結(jié)合后所形成的結(jié)合物(酶標(biāo)抗原),仍具有免疫反應(yīng)特性和酶的催化特性;(3)酶標(biāo)抗原和抗體結(jié)合后,結(jié)合物中的酶 ,能催化底物生成有色物質(zhì),且顏色的深淺,可作為判定抗原含量的依據(jù)。

　　檢測(cè)MCs的ELISA主要有三種基本類(lèi)型:抗原抗體復(fù)合物酶聯(lián)免疫法(IC ELISA),間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫法( Indirect cELISA)和直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫法( direct cELISA)。雷臘梅等對(duì)水樣、藻樣及水產(chǎn)品中MCs的濃度進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明 ,抗原抗體復(fù)合物酶聯(lián)免疫法靈敏度最高,以單抗包被酶標(biāo)板,整個(gè)測(cè)樣時(shí)間需要2.5h。直接競(jìng)爭(zhēng) ELISA 方法靈敏度相對(duì)較低,但操作最為簡(jiǎn)單,測(cè)樣時(shí)間只需1.5h。也基于這一原因 ,所以目前在市場(chǎng)上可購(gòu)買(mǎi)的MCs檢測(cè)試劑盒多采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法。

上一個(gè)：氨氮超標(biāo)的原因及處理辦法
下一個(gè)：A2O水處理工藝詳解
當(dāng)前頁(yè)面鏈接：http://www.takfung.cn/kpkt/504.html
聲明：所載內(nèi)容來(lái)源互聯(lián)網(wǎng)，僅供參考，交流之目的，轉(zhuǎn)載的稿件版權(quán)歸原創(chuàng)和機(jī)構(gòu)所有，如有侵權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系我們刪除。